Avaliação da longevidade de espermatozoides equinos congelados e descongelados submetidos a centrifugação e filtração

Resumo

A indústria do cavalo movimenta, no Brasil, aproximadamente R$16 bilhões de reais
por ano e gera 610 mil empregos diretos e indiretos. A demanda direcionada aos sistemas
de criação viabilizou o desenvolvimento de biotécnicas que permitissem um maior e melhor
potencial produtivo e reprodutivo de várias espécies. Entretanto, o sêmen equino congelado
e descongelado apresenta, relativamente, baixas taxas de fertilidade. Isso ocorre devido aos
danos causados pela criopreservação dos gametas masculinos que fazem com que ocorra
redução da longevidade espermática. Nesse contexto, técnicas foram criadas com o objetivo
de amenizar esses danos, tal como a separação do líquido seminal. A centrifugação e
filtração aumentam a concentração por meio da retirada do líquido seminal, porém, podem
causar danos à sua viabilidade. Sendo assim, objetivou-se com esse estudo avaliar os
procedimentos de filtração e centrifugação dos espermatozoides congelados e
descongelados, avaliando a longevidade das células pela observação das alterações dos
aspectos físicos durante a incubação por até 90 minutos. Foram utilizadas partidas do
esperma congelado de 10 equinos que foram divididas em 3 grupos: controle (CT),
Centrífuga e Sperm Filter. O grupo controle não foi submetido a nenhum processo de
separação mas apenas às análises de motilidade, vigor e contagem de células com
membrana íntegra, nos cinco diferentes tempos (T0= 0 minuto, T20= 20 minutos, T40= 40
minutos, T60= 60 minutos e T90= 90 minutos) do Teste de Termorresistência (TTR). O grupo
Centrífuga foi submetido à centrifugação por 10 minutos a 600 gravitacionais, ressuspendido
em meio crioprotetor com glicerol e analisado durante os cinco diferentes tempos do TTR. O
grupo Sperm Filter foi submetido à filtração através da membrana hidrofílica sintética e
ressuspendido em meio crioprotetor com glicerol e analisado nos diferentes tempos do TTR.
Nos 3 grupos foram analisados a motilidade total, vigor espermático e contagem de células
com membrana íntegra. A análise dos dados foi feita utilizando ANOVA com teste de Tukey
para motilidade e contagem de células com membrana íntegra e Kruskal-Wallis para o vigor.
Os resultados indicaram que a filtração espermática com auxílio da membrana hidrofílica
sintética tendeu a conservar melhor a motilidade espermática nos dois primeiros momentos
(T0: P= 0,082; T20: P= 0,088). Contudo, nas seguintes avaliações, percebeu-se uma variação
na motilidade dos grupos (T40: 21,5 ± 6,402; T60= 16,33 ± 5,188; T90= 12,00 ± 4,719) e não diferiu entre eles (P>0,05). Observou-se também que, com sêmen congelado, o grupo
Centrífuga selecionou espermatozoides mais íntegros no primeiro momento (T0), em
comparação com o grupo Sperm Filter. Contudo, mais estudos devem ser feitos com o
objetivo de elucidar por quais motivos o grupo Centrífuga foi mais eficaz aos demais grupos
com relação aos demais grupos, no primeiro momento depois de descongelados.